分会

第三分会：生物分析化学

摘要

本研究设计了一种基于目标物响应DNA水凝胶可控释放系统的ECL生物传感器用于Dam甲基转移酶的检测。该可控释放系统由透明质酸钠 (HA)、两端修饰氨基的DNA双链和少量聚乙烯亚胺(PEI)相互交联，同时包裹ECL信号分子Ru(bpy)32+掺杂的SiO2纳米粒 (Ru@SiO2 NPs)制备而成。其中，DNA双链设计为含有两段可以被Dam甲基转移酶识别和甲基化的特殊序列，甲基化的序列进而被DpnI酶特异性剪切。因此，当目标物存在时，水凝胶中DNA的连接被DpnI酶裂解，造成水凝胶三维结构的破裂，使大量Ru@SiO2纳米粒子释放到上清液中，收集上清液进行ECL检测，能够检测到较强的ECL信号。当目标物不存在时，DpnI酶不能剪切未被甲基化的DNA，信号分子无法释放，上清液的ECL信号较弱。该传感器在目标物浓度为1-40U/mL范围内存在良好的线性关系，检测限为0.08U/mL, 具有良好的选择性和重现性，且制备的水凝胶具有良好的储存稳定性。该传感器成功地应用于人体血清样品中DNA甲基转移酶的检测，取得了满意的结果。

关键词

电致化学发光;可控释放;甲基转移酶

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