中国化学会第32届学术年会
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级联i-motifs主导的电化学阻抗策略用于pH及末端转移酶传感
胡宇芳* 胡丹丹 胡凯悦 任信信 郭智勇 王邃

分会

第二分会:纳米传感

摘要

在医疗诊断和生命科学研究中,电化学生物传感器是应用最广泛的测试器件之一。我们基于交流阻抗技术和级联i-motifs策略发展了一种新型电化学生物传感策略应用于pH及末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)分析。首先,将三磷酸胞嘧啶核苷(dCTP)引入5’巯基DNA修饰的金电极表面,利用TdT工具酶角色催化延长该DNA的3’羟基末端,形成富C DNA长链。我们发现该富C DNA长链在中性条件下保持无规则单链状态;相反,在酸性条件下由于胞嘧啶C被部分质子化形成稳定的i-motif结构,且由于富C DNA长链优势形成了级联i-motifs。鉴于此原理,利用[Fe(CN)6]3-/4-作为氧化还原探针通过电化学阻抗谱(EIS)探讨因pH改变导致的富C DNA长链构型变化,一方面,中性条件下由于富C DNA长链的形成,获得较大的电化学阻抗值,另一方面,酸性条件下由于级联i-motifs的形成,获得较小的电化学阻抗值(半质子化富C DNA的形成有利于电子传导),形成一种十分有意义的电化学阻抗开关,从而实现pH传感分析。此外,这种电化学阻抗值取决于TdT活性大小,在没有TdT情况下,这种“off-on-off”开关无法构建,基于此可实现不同微环境下TdT活性分析及其小分子抑制剂筛选。目前尚未发现基于级联i-motifs阻抗开关实现不同微环境下pH及TdT活性动态监测的相关报导。

关键词

i-motif;电化学阻抗;pH;末端脱氧核苷酸转移酶;传感

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